Другие разделы:

 


Рейтинг@Mail.ru

 

Вирусология. Методы. Б. Мейхи

Вирусология. Методы

Б. Мейхи

Раздел: Микробиология, Вирусология


В книге авторов из Великобритании, Швейцарии и США приведены конкретные методики работы с большинством вирусов человека и животных. Каждый раздел включает подробное описание способов культивирования вирусов определенной группы, их концентрирования, очистки, определения инфекционного титра и других методов.
Для вирусологов, генетиков, молекулярных биологов, генных инженеров.

 

DJVU, 344 стр., 1988 г.
Артикул: 010508
Размер архива: 7,20 Мб

СКАЧАТЬ КНИГУ

 

--- СОДЕРЖАНИЕ ---

- От переводчика
- Предисловие к английскому изданию
- Список авторов
- Список сокращений
- Глава 1. Очистка, биофизическая и биохимическая характеристика вирусов (преимущественно вирусов растений)
- - Введение
- - Очистка вирусов растений
- - - Растения-хозяева
- - - Экстракция вирусов из растений
- - - Осветление экстрактов
- - - Концентрирование вирусов
- - - Дальнейшая очистка
- - - Что такое "чистота"?
- - - Хранение вирусных препаратов
- - - Конкретные методики очистки
- - Биофизическая характеристика
- - - Необходимость биофизической характеристики
- - - Ультрафиолетовые спектры
- - - Седиментационные свойства
- - - Коэффициенты диффузии
- - - Определение молекулярной массы
- - - Плавучая плотность
- - - Электронная микроскопия
- - - Обнаружение вирусов методом дот-блот гибридизации
- - Биохимический анализ
- - - Выделение нуклеиновых кислот
- - - Определение типа нуклеиновой кислоты
- - - Определение содержания нуклеиновой кислоты
- - - Гель-электрофорез нуклеиновых кислот
- - - Гель-электрофорез белков
- - - Гель-электрофорез вирусных частиц
- - Литература
- Глава 2. Культивирование, идентификация и очистка пикорнавирусов
- - Введение
- - Меры безопасности
- - Культивирование пикорнавирусов
- - - Выбор клеток
- - - Условия культивирования
- - - Сбор вирусов
- - - Наращивание полиовируса типа 3 для заражения клеток
- - - Получение меченного [35S]-метионином полиовируса типа 3 на монослойных клеточных культурах в химических пробирках
- - - Получение вируса в суспензионной культуре клеток HeLa
- - Идентификация вирусов
- - - Методы определения инфекционности
- - - Методы определения антигенных свойств
- - - Другие методы идентификации пикорнавирусов
- - Очистка вирусов
- - - Общие замечания
- - - Концентрирование пикорнавирусов
- - - Очистка пикорнавирусов
- - - Фракционирование пикорнавирусов
- - Литература
- Глава 3. Культивирование, титрование и очистка тогавирусов
- - Введение
- - Культивирование тогавирусов
- - - Заражение новорожденных мышат
- - - Выделение и наращивание тогавирусов в культуре клеток комаров
- - - Наращивание вирусов в культуре клеток млекопитающих
- - - Выращивание вирусов на комарах и их личинках
- - Титрование тогавирусов
- - - Титрование путем интрацеребрального заражения новорожденных мышат
- - - Титрование в культуре клеток
- - - Титрование методом гемагглютинации
- - Очистка тогавирусов
- - - Культивирование тогавирусов
- - - Концентрирование вирусов
- - - Очистка вирусов градиентным центрифугированием
- - Общие выводы
- - Благодарности
- Приложение
- - - Среды для культур тканей
- - - Среды для поддержания культур клеток
- - - Растворитель для природного материала
- - - Приготовление суспензии природного материала
- - - Обработка сывороток, используемых в РТГА
- - - Реактивы и буферные растворы
- - Литература
- Глава 4. Культивирование, очистка и титрование рабдовирусов
- - Введение
- - Наращивание рабдовирусов в культурах клеток
- - - Кривая нарастания титра в одитночном цикле размножения
- - - Титрование вирусов
- - Выделение и очистка вирусов
- - - Рабдовирусы животных
- - - Рабдовирусы растений
- - Литература
- Глава 5. Пневмовирусы
- - Уникальные особенности пневмовирусов
- - - Общее введение
- - - Номенклатура
- - - Выделение вируса
- - - Хранение вируса
- - Основные методы
- - - Культивирование респираторно-синцитиального вируса
- - - Методы определения инфекционности
- - - Гемагглютинация
- - - Гемадсорбция
- - - Иммунофлуоресцентные методы
- - - Твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA)
- - Аналитические методы
- - - Радиоактивное мечение, радиоиммуноанализ и радиоиммунопреципитация
- - - Метод выявления дефектных интерферирующих частиц
- - - Электронная микроскопия
- - - Концентрирование вируса
- - - Очистка и радиоактивное мечение РСВ
- - - Радиоактивное мечение варионной РНК
- - - Анализ вирусных РНК и белков методом электрофореза в полиакриламидном геле
- - - Очистка матричной РНК для трансляции
- - - Молекулярное клонирование и олигонуклеотидное секвенирование
- - - Очистка вирусных белков
- - Специальные биологические методы
- - - Получение моноклональных антител
- - - Выделение температурно-чувствительных мутантов
- - - Получение персистентно инфицированных клеточных культур
- - Литература
- Глава 6. Выращивание, очистка и титрование вирусов гриппа
- - Общее введение
- - Системы для размножения вирусов гриппа
- - - Куриные эмбрионы
- - - Наращивание вирусов в культурах клеток
- - - Органные культуры
- - Методы титрования вирусов
- - - Титрование вирусов гриппа в реакции гемагглютинации
- - - Титрование путем определения инфекционности для куриных эмбрионов
- - - Титрование вирусов с использованием фрагментов эмбрионов
- - - Титрование вирусов гриппа методом бляшек
- - - Электронная микроскопия вирусов гриппа
- - Очистка вирусов гриппа
- - - Введение
- - - Концентрирование вируса
- - - Методы очистки вирусов гриппа
- - Определение активности вирионных ферментов
- - - Вирионная транскриптаза
- - - Нейраминидаза
- - - Слияние вирусной и клеточной мембран
- - Хранение вирусных препаратов
- - Радиоактивное мечение вируса
- - - Введение метки в РНК
- - - Введение метки в белки
- - Среды и буферные растворы
- - - Среды для культуры клеток ФЭК
- - - Буферные растворы
- - Благодарности
- - Литература
- Глава 7. Вирусы, содержащие двунитевую РНК
- - Классификация вирусов, содержащих двунитевую РНК
- - Выделение вирусов и культуры клеток
- - - Поддержание культур клеток для наращивания реовирусов
- - - Получение вирусного инокулята
- - - Наращивание вирусов в больших масштабах
- - Очистка вирусов
- - - Сбор зараженных клеток и первая экстракция вируса
- - - Очистка вируса центрифугированием в градиенте
- - - Определение выхода и хранение очищенного вируса
- - Культивирование и очистка ротавирусов
- - - Адаптация к размножению в культуре клеток
- - Наращивание и очистка ротавирусов для биохимических исследований
- - Биохимические методы
- - - Транскрипция вирусных мРНК в бесклеточной системе
- - - Трансляция вирусных мРНК в бесклеточной системе
- - - Трансляция вирусных геномных днРНК для определения их кодирующих функций
- - - Молекулярное клонирование генома днРНК-содержащих вирусов
- Приложение
- - Литература
- Глава 8. Обезьяний вирус (SV40) и вирус полиомы: культивирование, титрование, трансформация и очистка вирусных компонентов
- - Введение
- - Техника безопасности при работе с вирусом полиомы и SV40
- - Культуры клеток, среды и буферы
- - - Культуры клеток
- - - Клетки-хозяева для SV40 и вируса полиомы
- - - Среды и сыворотки
- - - Буферы и растворы
- - Получение заготовок вируса
- - Очистка SV40 и вируса полиомы
- - - Равновесное центрифугирование в градиенте плотности CsCl
- - - Центрифугирование в градиенте плотности сахарозы
- - - Некоторые особенности методов работы с вирусом полиомы
- - Определение концентрации вируса
- - - Титрование вируса методом бляшек
- - - Идентификация вируса полиомы в реакции гемагглютинации
- - - Анализ вирусной ДНК электрофорезом в агарозном мини-геле
- - - Определение количества зараженных клеток с помощью иммунофлуоресцентного окрашивания культур на внутриядерный опухолевый антиген
- - Опухолевая трансформация клеток
- - - Инфицирование непермиссивных клеток
- - - Получение колоний на пластике в жидкой среде
- - - Получение колоний в полужидком агаре
- - Выделение вирусной ДНК и вирусных мини-хромосом из инфицированных клеток
- - - Экстракция вирусной ДНК
- - - Выделение мини-хромосом SV40
- - Благодарности
- - Литература
- Глава 9. Культивирование, очистка и титрование аденовирусов
- - Введение
- - Клеточные системы для культивирования аденовирусов
- - - Аденовирусы человека, легко адаптируемые к культуре клеток
- - - Аденовирусы человека, трудно адаптируемые к культуре клеток
- - - Вирусы других видов
- - Очистка
- - - Экстракция инфицированных клеток
- - - Очистка вируса из экстрактов инфицированных клеток
- - - Свойства очищенного вируса
- - Титрование вируса
- - - Титрование вируса методом бляшек
- - - Титрование вируса по ЦПД определением конечной точки
- - - Метод флуоресцирующих фокусов
- - - Общие замечания
- - Литература
- Глава 10. Культивирование, идентификация и очистка герпесвирусов
- - Введение
- - Вирусы простого герпеса типов 1 и 2
- - - Получение заготовок вируса
- - - Электронная микроскопия (подсчет частиц)
- - - Определение инфекционного титра
- - - Приготовление экстрактов клеток, инфицированных вирусом
- - - Получение очищенного вируса
- - - Другие альфа-герпесвирусы
- - Цитомегаловирус человека
- - - Получение заготовок вируса
- - - Цикл размножения
- - - Идентификация вируса
- - - Метод черных бляшек
- - - Культивирование и очистка CMV
- - - Типы частиц CMV
- - Герпесвирус саймири (HVS)
- - - Получение заготовок вируса
- - - Титрование вируса
- - - Цикл размножения
- - - Получение очищенного вируса
- - Благодарности
- - Литература
- Глава 11. Методы клинической вирусологии
- - Введение
- - Электронная микроскопия
- - - Прямое электронно-микроскопическое исследование фекалий
- - - Иммуноэлектронная микроскопия
- - Идентификация вирусных антигенов
- - - Идентификация респираторно-синцитиального вируса в носоглоточных выделениях методом иммунофлуоресценции
- - Культуры клеток
- - Иммунологические методы
- - - Реакция торможения гемагглютинации (РТГА)
- - - Реакция связывания комплемента (РСК)
- - - Радиальный гемолиз
- - - Обнаружение специфических IgM к вирусу краснухи методом "захвата" антител (antibody-capture technique)
- - Благодарности
- - Литература
- Предметный указатель
- Указатель латинских названий

 

скачать электронную медицинскую книгу Вирусология. Методы Б. Мейхи скачать книгу бесплатно